Diversité génétique et résistance aux antimicrobiens dans le streptocoque du groupe B colonisant de jeunes femmes non enceintes

L’application de l’analyse de séquence multilocus à 85 souches de Streptococcus B du groupe B recueillies chez des étudiants a révélé des similitudes et des différences dans la distribution des lignées de streptocoques du groupe B, par rapport à celle des femmes enceintes précédemment étudiées. populations, et a révélé que les souches de 1 clone étaient associées à la résistance aux antibiotiques

La colonisation par le streptocoque du groupe B du SGB des femmes enceintes est un facteur de risque critique pour la maladie néonatale invasive; ~20% des femmes enceintes [1] et 35% des jeunes femmes non enceintes [2] sont colonisées, avec des taux variant selon la population et le temps Parmi les 9 sérotypes de gabarit polysaccharidique du GBS, Ia, III et V sont le plus souvent associés à néonatale [3, 4] L’application du MLST à GBS a montré que les types de séquences spécifiques ST marquent les lignées habituellement associées au sérotype 1, bien que de nombreuses lignées comprennent un plus petit pourcentage d’autres souches avec différents types de capsules [5] Une lignée de GBS, ST-17, a été montrée dans des études antérieures [6, 7] pour provoquer plus souvent une maladie néonatale et a été suggérée pour avoir une invasion accrue [8] D’autres lignées, telles que ST-1, ST-19 et ST -23, semblent plus fréquents chez les femmes colonisées [7] On connaît peu la variation génétique et la distribution des lignées de SGB chez les femmes non enceintes en âge de procréer. Mieux comprendre les génotypes et les profils de résistance des souches de GBS circulant dans ce Ici, nous décrivons la distribution des STs GBS chez des étudiantes non enceintes et nous signalons les types de gélules et les fréquences de résistance aux antibiotiques en septembre-décembre 2006, Nous avons recruté 197 étudiants qui ont visité l’Université d’État du Michigan Olin Health Centre East Lansing L’approbation pour mener l’étude a été accordée par le Conseil d’examen médical et biomédical institutionnel à Michigan State University, et un consentement éclairé a été obtenu de tous les participants. Les participants ont collecté des spécimens vaginaux et rectaux en utilisant le système de prélèvement Culture Swab Plus Baltimore Biological Labs et ont rempli un questionnaire sur les antécédents médicaux et les symptômes cliniques. Des plants ont été inoculés dans du bouillon Todd-Hewitt avec de la gentamicine et de l’acide nalidixique. % moutons blo od, et ont été incubées pendant une nuit à 37 ° C dans du dioxyde de carbone. Les bouillons ont été criblés par le kit PathelDx Remel qui détecte l’antigène du groupe B et un test CAMP Christie-Atkins-Munch-Peterson a été réalisé sur des colonies suspectes. par PCR et séquençage de 7 gènes de ménage, comme décrit ailleurs [5] [5] Les souches ont été caractérisées par génotypage capsule cps [5] et pour les sensibilités à la pénicilline, ampicilline, céfazoline, lévofloxacine, érythromycine Des lignes directrices interprétatives communes [9] ont été utilisées pour tous les antibiotiques sauf la céfazoline, pour lesquels nous avons utilisé des points de rupture décrits ailleurs [10] Analyse de régression logistique multivariée avec ajustement pour l’âge, l’origine ethnique, les troubles respiratoires récents. infection, infection récente des voies urinaires, symptômes vaginaux, antécédents d’infections sexuellement transmissibles et utilisation récente d’antibiotiques Pour identifier les prédicteurs de la résistance Les infections sexuellement transmissibles ont été classées comme ≤1 des suivantes: infection des voies urinaires, infection à levures, hépatite, chlamydia, vaginose bactérienne, herpès, infection par le papillomavirus humain, verrues génitales ou trichomonasResults Parmi les 197 femmes inscrites, 68 % se sont identifiés comme étant de race blanche, 55% avaient entre 18 et 20 ans, 34% ont signalé des symptômes respiratoires et 12% avaient pris des antibiotiques au cours des 2 semaines précédentes. par rapport à l’ensemble de la communauté de la Michigan State University au moment de l’étude 74% Quatre-vingts 406% des 197 femmes ont été colonisées avec GBS; 12 15% et 14 175% des 80 femmes n’avaient qu’une colonisation vaginale ou seulement rectale, tandis que 54 675% étaient colonisées aux deux sites. Cinq des 80 femmes avaient un génotype GBS> 1, donnant 85 isolats pour la caractérisation moléculaire. STs parmi les 85 souches figure 1, avec 4 clones représentant 65% des souches de GBS Les ST prédominantes étaient ST-1 20%, ST-22 18%, ST-23 14%, et ST-19 13% Six variantes de STs ont été identifiés: les variants ST-23 différaient en variants sdhA 2 et variant tkt 1, 1 variant ST-196 différait en sdhA, et 2 souches apparentées à ST-88 et ST-22 présentaient une combinaison unique d’allèles Globalement, cps2 27%, cps1a 24% et cps5 20% prédominent

femmes; 1 de ces femmes avait 2 types de SGB qui étaient résistants, résultant en 47 souches résistantes Les profils de résistance inclus l’azithromycine, la clindamycine, et la résistance à l’érythromycine 35 [745%] des 47 souches; résistance à l’azithromycine et à l’érythromycine 9 [191%]; et la résistance à la clindamycine seulement 3 [64%] Les données MLST ont été utilisées pour évaluer si certaines ST étaient associées à la résistance. Figure 1 Toutes les souches ST-1 étaient résistantes, une différence statistiquement significative comparée à toutes les autres cps et ST. combinaisons X2 = 106; 1 df; P = 001 L’analyse de régression logistique a révélé que les femmes de race blanche OR, 44; IC à 95%, 140-1387; P = 01 et les femmes ayant des antécédents d’infections transmissibles sexuellement OU, 34; IC à 95%, 114-1002; P = 03 étaient plus fréquemment colonisées par des souches résistantes. Discussion Les ST prédominantes, par exemple ST-1, ST-19 et ST-23, détectées dans des études antérieures sur des souches de femmes enceintes [5, 7, 8] femmes non enceintes Ces clones représentent probablement des souches qui sont bien adaptées à la muqueuse vaginale. Le deuxième clone le plus répandu dans notre population non enceinte était ST-22 n = 15; 188%, qui se produisait fréquemment chez les femmes colonisatrices d’Israël 11 [106%] des participants de cette étude [8], mais pas le Canada 5 [1%] [5] ou l’Angleterre 5 [26%] [7] La ​​différence dans la prévalence de ST-22 entre cette population et les populations canadienne et anglaise séparément et combinées X2 = 336; 1 df; P <001 était statistiquement significatif, alors qu'aucune différence dans la prévalence de ST-22 n'a été observée entre les femmes non enceintes dans notre étude et la population israélienne X2 = 32; 1 df; P = 07 De plus, les femmes canadiennes et anglophones présentaient ensemble une prévalence significativement plus faible de la colonisation par ST-22 que les femmes d'Israël X2 = 101; 1 df; P = 001 Aucune différence statistiquement significative n'a été observée dans la prévalence de la colonisation par ST-17 entre les populations maternelle et non-enceinte X2 = 17; 1 df; P = 2, mais le petit nombre de femmes non enceintes avec la colonisation ST-17 signifie que ce résultat doit être interprété avec prudence. Les tests de sensibilité aux antibiotiques ont révélé une fréquence anormalement élevée de résistance aux antibiotiques chez ce groupe de femmes non enceintes. dans les taux de résistance dans le temps, les fréquences observées sont plus élevées que celles d'une population similaire [10] et peuvent refléter des tendances de résistance croissantes Le génotypage par MLST a révélé une prépondérance significative du génotype STP-1 cps5 parmi les souches résistantes, ce qui est compatible avec rapport précédent [11]; La plupart des souches ST-1 possèdent la capsule de type V [5-8, 11]. Ces résultats soutiennent l'hypothèse que la dissémination clonale et le transfert horizontal de gènes de résistance, tels que l'ermB, contribuent fréquemment à la résistance macrolide parmi les souches de sérotype V [ 11, 12] Des études à grande échelle explorant la distribution des clones résistants sont justifiées, de même qu'une évaluation des différences de contenu génétique entre la lignée résistante ST-1 et la lignée sensible ST-8, afin d'identifier des mécanismes de résistance supplémentaires pouvant contribuer Dans la présente étude, 13 des 15 femmes colonisées par des souches ST-1 cps5 étaient caucasiennes. La découverte de l'ethnie caucasienne associée à une résistance était inattendue, car une étude antérieure de la résistance au SGB chez les femmes enceintes a identifié une association entre Ethnicité américaine [13] Ces résultats suggèrent que les facteurs contribuant à la résistance varient selon la population, ce qui peut être lié à l'anti Différences d'utilisation biotique ou variation de la prévalence des lignées associées à la résistance Ces résultats nécessitent d'être confirmés par des études sur des femmes non enceintes de différentes origines ethniques. En résumé, l'analyse génétique de MLST de souches GBS de jeunes femmes non enceintes a révélé que les souches ST- 1 lignées sont plus fréquemment résistantes aux antibiotiques et que 3 lignées communes de GBS ST-1, ST-19 et ST-23 identifiées dans d'autres populations prédominent également dans les souches colonisatrices de cette population [5, 7, 8] Cette dernière observation indique que la distribution de certains clones de SGB est très répandue. Cependant, nous avons également observé une forte prévalence de souches ST-22, rarement rencontrées dans deux études maternelles antérieures [5, 7] mais dans plus de 11% des souches colonisatrices isolées de mères en Israël , ce qui suggère que, comme pour les sérotypes [4], la distribution des clones de SGB peut varier selon la population ou le temps, pourrait avoir un impact sur l'efficacité de certains vaccins GBS Tout vaccin à base de gélules ou de protéines ne couvrant pas les génotypes GBS prédominants en circulation peut avoir un succès limité, car il est possible que les réponses anticorps varient en raison des différences dans la composition clonale. souches colonisatrices Des études futures sont nécessaires pour évaluer si ces réponses anticorps spécifiques au SGB diffèrent entre les lignées

Remerciements

Nous remercions le personnel du Centre de santé Olin de la Michigan State University, en particulier Barbara Forney; Richard Bortel de Sparty’s; Sarah Marzec; Les Drs James Rudrik et Patricia Somsel du Département de santé communautaire du Michigan; et les participantsSupport financierInstitut national de la santé Service de santé publique AI066081Conflits d’intérêts potentielsTous les auteurs: pas de conflits