Le génotypage des isolats Kingella kingae invasifs révèle des clones prédominants et une association avec des syndromes cliniques spécifiques

Contexte Malgré la reconnaissance croissante de Kingella kingae en tant que pathogène important de la petite enfance, la fréquence relative et le caractère invasif des différentes souches de l’organisme n’ont pas été étudiés. Une étude a été menée pour déterminer l’association des génotypes K kingae avec les syndromes temporaux spécifiques. et distribution géographique des clones invasifsMéthodes Une collection de 181 souches invasives de K kingae, isolées entre 1991 et 2012 de patients israéliens atteints de bactériémie, d’infections du système squelettique ou d’endocardite, ont été typées par électrophorèse en champ pulsé. PFGE En outre, la correspondance entre PFGE, MLSTs, et les résultats du séquençage du gène rtxA ont également été examinés pour les organismes appartenant aux clones PFGE prédominants isolés de porteurs asymptomatiques et les patients présentant des infections invasivesRésultats Un total de 32 clones K kingae différents ont été identifiés par PFGE, dont 5 B, H, K, N et P ont provoqué 729% de tous les fémorale, avec des infections du système squelettique, et le clone P avec des souches d’endocardite bactérienne appartenant au même clone PFGE, soit porté asymptomatiquement ou non. Bien que K kingae présente une hétérogénéité génétique remarquable, un nombre limité de clones distincts causent la majorité des infections invasives en Israël, présentant une stabilité génétique, une persistance à long terme, et une large gamme de clones. dispersion géographique Les souches de K kingae montrent également une association significative avec des syndromes cliniques spécifiques

À la suite de l’inoculation du liquide synovial et des exsudats osseux des enfants atteints d’arthrite dans des flacons de culture hématologique et l’utilisation de méthodes d’amplification des acides nucléiques, Kingella kingae est de plus en plus reconnue comme une étiologie commune de bactériémie, d’arthrite septique et d’ostéomyélite. 3 ans [1-7] Moins fréquemment, l’organisme provoque l’endocardite, la spondylodiscite et la méningite chez les patients pédiatriques et adultes [8] K Kingae est porté asymptomatiquement dans le pharynx des jeunes enfants, et ce phénomène a des implications importantes pour la transmission de l’organisme et pathogenèse de la maladie invasive [9] Des recherches ont montré que la bactérie se propage de l’enfant à l’enfant par des contacts étroits au sein des familles et chez les participants [10-13] En outre, des isolats génotypiquement identiques pharynx et la circulation sanguine, soutenant le concept que la colonisation des voies respiratoires supérieures représente un p dans la pathogenèse des infections invasives [14, 15] On ignore actuellement, cependant, si toutes les souches de K kingae ont une capacité similaire à provoquer des maladies humaines et si certains clones sont associés à des syndromes cliniques particuliers. dans différentes régions d’Israël sur une période de 21 ans, a été étudié pour étudier la fréquence des différents clones de K kingae, leur distribution par temps et lieu d’isolement, et leur association potentielle avec des maladies cliniques spécifiques

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Source de souches de K kingae invasives

Le Laboratoire de Microbiologie Clinique du Centre Médical Universitaire Soroka CML-SUMC, situé dans le sud d’Israël, a été un pionnier dans l’utilisation de la méthode des flacons de culture sanguine pour la culture d’exsudats synoviaux chez des enfants atteints d’arthrite septique présomptive. 130 infections invasives à K Kingae depuis 1988 [1, 2] Au fil des années, cette pratique bactériologique a été progressivement adoptée dans d’autres hôpitaux israéliens, améliorant ainsi la détection de la culture de l’organisme [2] Le CML-SUMC sert de centre national de référence pour identifier les organismes K kingae, un grand nombre d’isolats invasifs provenant de patients israéliens d’autres régions du pays étaient également disponibles pour la dactylographie

Données patient

Les données démographiques et cliniques des patients atteints de la maladie de K Kingae invasive, définie comme l’isolement de l’organisme d’un site corporel normalement stérile, ont été recueillies prospectivement à la CML-SUMC depuis la fin des années 1980. Les données de laboratoire ont été consultées. syndrome clinique ont été extraites Cette information était également disponible pour la majorité des isolats provenant d’autres régions du pays Les syndromes cliniques ont été divisés en 3 catégories mutuellement exclusives: 1 bactériémie incluant bactériémie sans foyer et bactériémie associée à des symptômes respiratoires mais pas d’infection focale impliquant les articulations, les os, les tendons, ou l’endocarde, 2 infections du système squelettique, y compris l’ostéomyélite, l’arthrite septique, l’arthrose avortée [8], et la ténosynovite, et 3 endocardite

Source de souches de K kingae colonisatrices

Pour étudier la relation entre les organismes qui colonisent les voies respiratoires et ceux isolés des patients atteints de maladie invasive, une collection de> 450 souches isolées de porteurs sains, déjà caractérisée par électrophorèse sur gel à champ pulsé PFGE, était disponible. études sur le transport de K kingae menées chez les enfants vivant dans le sud et le centre d’Israël au cours des deux dernières décennies. Les détails de la population dont ces souches sont issues et les protocoles de culture utilisés sont fournis ailleurs [9-11, 13]

Identification de K kingae

Les isolats ont été identifiés sur la base des caractéristiques morphologiques et culturelles typiques de l’espèce [16] et confirmés par le kit API NH bioMérieux, Marcy-l’Etoile, France Les isolats ont été conservés à -70 ° C dans une solution à 15% de glycérol. contenant du bouillon jusqu’à nouvel essai

Analyse PFGE

L’ADN chromosomique des isolats de K kingae a été purifié par la méthode de Maslow et al. [17] La ​​digestion enzymatique a été réalisée avec EagI selon les directives des fabricants New England Biolabs, Ipswich, MA, et les fragments de restriction résultants ont été séparés dans un appareil électrique homogène contrarotié. Les conditions électrophorétiques utilisées étaient de 6 V / cm, 14 ° C, rampe 5-35 secondes, et 23 heures Les profils de restriction ont été visualisés par fluorescence au bromure d’éthidium et photographiés par une collection de cultures de type américain. L’organisme Kingae ATCC 23330, caractérisé par des méthodes de génotypage dans des études antérieures [11-14], a été utilisé comme souche de référence

Interprétation des résultats PFGE

Pour estimer la parenté génétique entre les souches, les profils de restriction ont été interprétés selon les critères proposés par Tenover et al. [18] Les isolats présentant des profils PFGE similaires, indiscernables et étroitement apparentés ont été considérés appartenir au même clone.

MLST et le typage de séquençage de gène rtxA

Un échantillon aléatoire d’isolats de K kingae appartenant aux clones PFGE prédominants, provenant de patients atteints de diverses maladies invasives et de porteurs sains, a été ensuite typé par séquençage du gène MLST et du gène rtxA des séquences multilocus. Les séquences des six gènes abcZ, adk , aroE, cpn60, gdh et recA utilisés pour MLST, ainsi que ceux du gène rtxA, ont été décrits ailleurs [7, 19] Un numéro d’allèle différent a été donné à chaque séquence distincte dans un locus, et un type de séquence ST nombre a été attribué à chaque combinaison d’allèles distincts Les isolats ont été regroupés en ST ST complexes STC s’ils différaient au plus 1 locus d’au moins un autre membre du groupe La ST des souches examinées est disponible sur le site Web de l’Institut Pasteur de Paris http : // wwwpasteurfr / recherche / genopole / PF8 / mlst / Kingellakingaehtml, et les allèles rtxA 1, 6, 8, 9, 10, 12, 14 et 19 sont déposés dans Genbank sous les numéros d’accès JQ340459, JQ340464, JQ340466, JQ340467, JQ3404 68, JQ340470, JQ340472 et JQ801376, respectivement

Analyses statistiques

Pour évaluer si certains clones PFGE étaient surreprésentés dans la population, c’est-à-dire si le nombre d’isolements trouvés appartenir à un clone donné différait significativement de ce qui aurait dû être attendu d’une distribution aléatoire, le ratio observé / attendu pour chaque clone a été calculé good2 test d’adéquation Le nombre attendu d’isolats était la moyenne résultant de la division du nombre total d’isolats par le nombre de clones PFGE différents identifiés, et le nombre observé était le nombre réel d’isolats trouvés appartenir à un groupe donné. La répartition des différents clones PFGE par période d’isolement avant ou après le 1er janvier 2001, la localisation géographique du sud, du centre, de l’est ou du nord d’Israël et la bactériémie du syndrome clinique, l’infection du squelette ou l’endocardite ont également été déterminées. évaluer la signification statistique entre les proportions AP valeur de & lt; 05 a été considéré comme statistiquement significatif pour tous les calculs

Estimation du pouvoir invasif spécifique au site des clones de K kingae

Le potentiel des clones K kingae individuels à provoquer des infections du système squelettique a été évalué en utilisant la méthode décrite par Brueggemann et al [20], avec les modifications appropriées. Un odds ratio empirique a été calculé pour les clones invasifs K kingae les plus communs en référence à tous les autres. clones comme suit: OU pour clone π = ad / bc, où a est le nombre d’isolats appartenant au clone π causant des infections squelettiques, b est le nombre de clones π isolats causant d’autres syndromes, c est le nombre d’isolats non clones π provoquant des squelettes infections par le système, et d est le nombre d’isolats non clones qui provoquent d’autres syndromes Par exemple, un OR> 1 indique une probabilité accrue pour un clone donné de provoquer une infection du système squelettique et un OR & lt; 1 indique une probabilité réduite pour le clone. envahir les tissus squelettiques En utilisant une méthode similaire, les OR pour l’association de clones invasifs avec une bactériémie ou une endocardite ont également été calculés. Nous avons calculé des intervalles de confiance à 95% ICs au moyen du logiciel MedCalc, version 1211 Mariakerke, Belgique Lorsque l’IC à 95% n’incluait pas l’unité, le RO observé a été considéré statistiquement significatif. Pour les besoins du calcul, les isolats pour lesquels le syndrome clinique associé était inconnu ont été ignorés

RÉSULTATS

Cent vingt treize souches de K kingae invasives isolées entre 1991 et 2012 ont pu être retrouvées et étudiées. Cent vingt treize souches ont été isolées dans le sud d’Israël, 22 121% dans le centre d’Israël, 22 121% dans l’est d’Israël et 24 133% dans le sud d’Israël. La région septentrionale Tableau supplémentaire 1 Soixante-neuf souches 381% ont été isolées d’enfants atteints de bactériémie, 97 536% d’enfants ayant des infections du squelette et 11 61% de patients adultes et pédiatriques atteints d’endocardite. 4 isolats 22% Globalement, 32 clones PFGE distincts ont été identifiés, dont 18 563% ont été trouvés chez plusieurs patients et 14 étaient uniques. Les 5 clones prédominants, à savoir B, H, K, N et P, regroupaient 132 729% d’isolats Le clone B a été retrouvé dans 21 116% des isolats, le clone H dans 27 149%, le clone K dans 51 282%, le clone N dans 25 138% et le clone P dans 8 44% La surreprésentation des clones B, H, K et N atteint une grande signification statistique P & lt; 005 Le clone N représentait 18 des 77 234% d’organismes K Kingae invasifs isolés en Israël entre 1991 et 2000, mais seulement 7 sur 104 67% isolés sur la période 2001-2012 P = 003 Aucune différence significative dans la distribution temporelle des autres clones n’a été détectée, Tableau 1 Les isolats du clone K étaient positivement associés à la bactériémie et négativement à l’invasion du système squelettique, la tendance opposée a été observée pour le clone N et les clones N, à savoir K, N et P, significativement associés à des syndromes cliniques spécifiques. Le clone P était fortement associé à l’endocardite bactérienne Les clones prédominants restants B et H ne présentaient aucun lien significatif avec un syndrome clinique particulier. Les 4 isolats dont le syndrome clinique associé était inconnu appartenaient aux clones H n = 1, K n = 1 et N n = 2

Tableau 1 Distribution de 3 clones Kingella kingae prédominants, par syndrome clinique, et signification statistique de leur association avec des maladies spécifiques Bactériémie n = 69 Infection squelettique n = 97 Endocardite n = 11 Clone PFGE Non OU 95% CI P Non OU 95% CI P Non OU 95% CI P K n = 50 28 267 136-522 0041 20 43 22-84 0141 2 55 11-262 NS N n = 23 4 29 09-89 0302 18 342 121-967 0205 1 65 08-537 NS P n = 8 3 94 22-405 NS 2 26 05-132 NS 3 1208 244-5967 0022 Bactériémie n = 69 Infection squelettique n = 97 Endocardite n = 11 Clone PFGE Non OU 95% CI P Non OU 95% CI P Non OU IC 95% P K n = 50 28 267 136-522 0041 20 43 22-84 0141 2 55 11-262 ND N n = 23 4 29 09-89 0302 18 342 121-967 0205 1 65 08-537 NS P n = 8 3 94 22-405 NS 2 26 05-132 NS 3 1208 244-5967 0022 Abréviations: IC, intervalle de confiance; NS, non significatif; OU, odds ratio; PFGE, électrophorèse en champ pulséView LargeTable 2 montre l’association des clones PFGE prédominants avec MLST ST et STCs et avec le séquençage du gène rtxA Les résultats ont montré une congruence remarquable entre les 3 méthodes de typage, sans tenir compte du portage asymptomatique ou des infections invasives. temps ou lieu d’isolement Les souches appartenant au même clone PFGE partageaient les STC MLST et présentaient des allèles du gène rtxA identiques ou étroitement apparentés. Une seule exception a été observée, l’isolat KK180 ST 10 appartenant au clone PFGE N STC35 Tableau 2 Cependant, il convient de noter que ST10 est étroitement liée à STC 35 [19], et par conséquent cette différence mineure n’a pas modifié la congruence globale entre PFGE et MLST

et région d’isolement, type de séquence multitropique et résultat de typage de séquence rtxA Clone de PFGE porteurs sains Durée de la souche de maladie invasive, région MLST rtxA Allele Strain Time, région Syndrome clinique MLST rtxA allèle ST STC ST STC B BB728 2006, S 22 23 1 KK81 1991 , S Infection squelettique 22 23 1 C1563 2006, S 22 23 1 KK98 1992, S Bactériémie 22 23 1 C1724 2007, S 22 23 1 KK142 1998, S Infection squelettique 22 23 1 … … … … KK217 2004, S Bactériémie 22 23 1 .. arthrite. … … … KK256 2007, S Bactériémie 21 23 1 … … … … KK409 2010, E Endocardite 21 23 1 H KK12 1994, S 14 14 14 KK64 Années 1990, N Infection squelettique 15 14 14 PV1572 2006, S UT UT 14 KK127 Années 1990 , N Infection squelettique 16 14 14 AA026 2006, S 37 14 14 KK83 1991, S Infection squelettique 14 14 14 AA203 2006, S 14 14 14 KK70 1993, S Infection squelettique 4 14 14 … … … … KK136 1998, N Bactériémie 14 1 4 14 … … … … KK154 1999, S Bactériémie 18 14 14 … … … … KK407 2011, S Bactériémie 18 14 14 K KK6 1994, S 6 6 9 KK101 1992, S Infection squelettique 6 6 10 KK86 1994, S 6 6 10 KK71 1994, S Bactériémie 6 6 10 KK107 1996, S 6 6 10 KK92 1996, N Bactériémie 6 6 19 KK203 2004, S 6 6 8 KK145 1998, E Infection squelettique 6 6 10 AA417 2006, S 6 6 8 KK156 2002, S Infection squelettique 6 6 10 AA242 2006, S 6 6 19 KK199 2004, E Endocardite 6 6 10 BB290 2006, S 6 6 8 KK260 2007, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK252 2007, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK411 2008, E Endocardite 6 6 8 … … … … KK403 2008, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK274 2009, S Infection squelettique 6 6 8 N AA068 2007, S 35 35 6 KK75 1991, S Infection squelettique 35 35 6 … … … … KK59 1993, S Bactériémie 35 35 6 … … … … KK141 199 8, S Infection squelettique 35 35 6 … … … … KK158 1999, S Infection squelettique 36 35 6 … … … … KK180 2002, C Endocardite 10 … 6 … … … … KK189 2002, S Bactériémie 35 35 6 … … … … BB11960 2004, C Infection squelettique 35 35 6 P … … … … KK128 Années 1990, N Endocardite 24 23 12 … … … … KK93 1995, S Bactériémie 24 23 12 … … … … KK100 1996, S Infection squelettique 24 23 12 … … … … KK144 1998, S Infection squelettique 24 23 12 … … … … KK164 2000, S Bactériémie 23 23 5 … … … … KK190 2002, S Endocardite 24 23 12 … … … … KK197 2003, C Endocardite 24 23 12 … … … … KK271 2009, S Bactériémie 24 23 12 PFGE clone Porteurs sains Période de la maladie invasive, Région MLST rtxA Allele Strain Temps, Région Syndrome clinique MLST rtxA Allèle ST STC ST STC B BB728 2006, S 22 23 1 KK81 1991, S Infection squelettique 22 23 1 C1563 2006, S 22 23 1 KK98 1992, S Bactériémie 22 23 1 C1724 2007, S 22 23 1 KK142 1998, S Infection squelettique 22 23 1 … … … … KK217 2004, S Bactériémie 22 23 1 … … … … KK256 2007, S Bactériémie 21 23 1 … … … … KK409 2010, E Endocardite 21 23 1 H KK12 1994, S 14 14 14 KK64 Années 1990, N Infection squelettique 15 14 14 PV1572 2006, S UT UT 14 KK127 Années 1990, N Infection squelettique 16 14 14 AA026 2006, S 37 14 14 KK83 1991, S Infection squelettique 14 14 14 AA203 2006, S 14 14 14 KK70 1993, S Infection squelettique 4 14 14 … … … … KK136 1998, N Bactériémie 14 14 14 … … … … KK154 1999, S Bactériémie 18 14 14 … … … … KK407 2011, S Bactériémie 18 14 14 K KK6 1994, S 6 6 9 KK101 1992, S Infection squelettique 6 6 10 KK86 1994, S 6 6 10 KK71 1994, S Bactériémie 6 6 10 KK107 1996, S 6 6 10 KK92 1996, N Bactériémie 6 6 19 KK203 2004, S 6 6 8 KK145 1998, E Infection squelettique 6 6 10 AA417 2006, S 6 6 8 KK156 2002, S Infection squelettique 6 6 10 AA242 2006, S 6 6 19 KK199 2004, E Endocardite 6 6 10 BB290 2006, S 6 6 8 KK260 2007, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK252 2007, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK411 2008, E Endocardite 6 6 8 … … … … KK403 2008, S Bactériémie 6 6 8 … … … … KK274 2009, S Infection squelettique 6 6 8 N AA068 2007, S 35 35 6 KK75 1991, S Infection squelettique 35 35 6 … … … … KK59 1993, S Bactériémie 35 35 6 … … … … KK141 1998, S Infection squelettique 35 35 6 … … … … KK158 1999, S Infection squelettique 36 35 6 … … … … KK180 2002, C Endocardite 10 … 6 … … … … KK189 2002, S Bactériémie 35 35 6 … … … … BB11960 2004, C Squelette infection 35 35 6 P … … … … KK128 années 1990, N Endocardite 24 23 12 … … … … KK93 1995, S Bactériémie 24 23 12 … … … … KK100 1996, S Infection squelettique 24 23 12 … … … … KK144 1998, S Infection squelettique 24 23 12 … … … … KK164 2000, S Bactériémie 23 23 5 … … … … KK190 2002, S Endocardite 24 23 12 … … … … KK197 2003, C Endocardite 24 23 12 … … … … KK271 2009, S Bactériémie 24 23 12 Abréviations: C, Israël central; E, Israël oriental; MLST, type de séquence multilocus; N, nord d’Israël; PFGE, électrophorèse sur gel à champ pulsé; S, sud d’Israël; ST, type de séquence; STC, complexe de type de séquence; UT, untypeableView LargeOf note, STs nous a permis de distinguer plusieurs sous-clones Par exemple, parmi les 10 clones typables H typables, 6 ST différents ont été observés Tableau 2 En outre, bien que STC 23 était partagé par les clones B et P, MLST a montré que chaque clone PFGE a été caractérisé par des STs différents. Il est intéressant de noter que ces clones étroitement apparentés abritaient 2 allèles rtxA apparentés lointain allèle 1 dans les souches du clone B et l’allèle 12 dans la plupart des souches du clone P [19]

DISCUSSION

Les gènes accessoires codant pour les facteurs de virulence et les antigènes exposés à la surface sont soumis à une pression sélective élevée et, par conséquent, ont tendance à changer rapidement pour échapper à la réponse immunitaire. clones comprennent des populations distinctes de bactéries génétiquement homogènesIl pourrait être suggéré que ces clones prédominants ont émergé récemment parce que le rythme d’accumulation différente de la diversité allélique dans les gènes core et accessoires sur une période prolongée aurait dû entraîner une perte progressive de la congruence des résultats de typage [22] le fait que les clones prédominants aient maintenu une configuration génétique identique depuis au moins 2 décennies et disséminée dans tout le pays ne supporte pas cette possibilité. Alternativement, le déséquilibre de liaison observé pourrait suggérer que ces souches présentent un profil génomique fortement favorisé par sélection, résistance l’homogénéisation effets de la recombinaison et de la mutation Une colonisation accrue de la colonisation aurait entraîné une expansion clonale, expliquant la vaste circulation des clones épidémiques parmi la population pédiatrique israélienneK kingae clones PFGE A, C, G, J, M, R, T et U, qui représentaient collectivement 388% de toutes les souches récupérées de 240 porteurs sains dans une enquête communautaire [11], ne représentaient que 44% des isolats invasifs dans la présente étude. Cet écart suggère un compromis entre transmissibilité et virulence car en envahissant les organes profonds, les bactéries perdent accès aux En outre, les personnes malades sont isolées des autres membres de la communauté, sont traitées avec des médicaments antimicrobiens et peuvent même succomber à la maladie. Évidemment, tous ces scénarios possibles interrompent la chaîne de En revanche, le clone N, qui était un agent étiologique commun de la maladie de Kingae invasive en I Dans les années 1990, le srael n’est presque jamais trouvé comme colonisateur pharyngien chez les enfants en bonne santé [11], était négativement associé à la bactériémie mais présentait une affinité significative pour les infections osseuses et articulaires. Ces observations indiquent que les souches les voies respiratoires et la circulation sanguine, ce qui implique que la persistance dans ces niches peut nécessiter une spécialisation biologique différente. Ce concept confirme que l’organisme a été retrouvé dans le sang de seulement 11 des 69 enfants dont 159% avaient une arthrite K kingae l’ostéomyélite diagnostiquée dans le sud d’Israël au cours des années, suggérant que les bactéries qui envahissent les tissus squelettiques ne sont pas capables de survivre dans le sang pendant de longues périodes. Les organismes Clone P, exceptionnellement portés asymptomatiquement [11], étaient fortement associés à l’endocardite bactérienne. rare dans d’autres sites infectésClone K organismes, de l’autre han D semble présenter un équilibre optimal entre transmissibilité et invasivité Ce clone PFGE était la souche prédominante détectée dès 1993 dans une garderie du sud d’Israël, qui a duré jusqu’à 4 mois dans le pharynx des participants colonisés [10]. Parmi les souches portées par des enfants sains juifs dans une étude 2006-2007 [11] Clone K organismes, qui représentaient 417% de toutes les souches invasives isolées dans le sud d’Israël au cours des 2 dernières décennies et étaient responsables de l’excès de morbidité K Il est intéressant de noter que toutes les souches de clones K abritent une duplication ou une triplication de la séquence rtxA de 33 paires de bases, qui est exceptionnellement retrouvée dans la population de la région. autres clones [19] Que cette répétition dans un gène codant pour un facteur de virulence putatif contribue au succès épidémique du clone reste spéculatif Ces études démontrent que, bien que diverses souches de K kingae circulent dans la population pédiatrique d’Israël, un petit sous-groupe est responsable de la plupart des infections cliniques, et quelques-unes présentent une association significative avec des maladies cliniques particulières. Déterminer quels sont les facteurs bactériens les plus étroitement liés à la colonisation, au caractère envahissant et à la prolifération dans des environnements normalement stériles tels que la circulation sanguine et les tissus squelettiques ou endocardiques nécessiteront l’utilisation de ces données. de modèles animaux expérimentaux et de comparaisons de génomes entiers [19] Les résultats actuels, dans lesquels certains clones K kingae ont été trouvés au niveau de la population pour être principalement limités au portage asymptomatique ou associés à des syndromes cliniques spécifiques, devraient guider la conception de ces études. et la sélection des souches à étudier [20, 24]

Remarques

Remerciements Nous remercions Michael Friger, pour son aide dans l’analyse statistique, et les directeurs des laboratoires de microbiologie clinique d’Israël pour avoir fourni leurs isolats de K Kingae au fil des ans. Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: Aucun conflit signaléTous les auteurs ont soumis l’ICMJE Formulaire de divulgation des conflits d’intérêts potentiels Les conflits que les éditeurs jugent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués